每個高壓滅菌器負載都需要進行滅菌監測，包括要求和推薦的機械和化學指示劑，以及根據您所在位置的孢子測試（生物指示劑，又稱 BI）。讓我們面對現實吧，至少可以說發現錯誤或設備不工作是最令人失望的。然而，更糟糕的是，沒有意識到關鍵過程不起作用。根據您所在的位置，可能需要或建議進行孢子測試，并且指示的用途和頻率也會有所不同。在某些地方，可能不明確推薦孢子測試，但需要遵循高壓滅菌器制造商的使用說明，其中包括指定的孢子測試。
孢子檢測提供了一種可靠的無菌保證方法。在高壓滅菌器中，使用嗜熱脂肪地芽孢桿菌孢子。與機械或化學指示劑不同，孢子測試確定孢子——最具抵抗力的微生物——已在滅菌過程中被殺死。在未包裝負載的情況下，它表明器械在離開高壓滅菌器之前已經過消毒。
提供辦公室和實驗室孢子測試。辦公室孢子測試需要使用培養箱并且更快，而實驗室測試提供獨立的第三方結果。隨著辦公室孢子測試的數字記錄的可用性，驗證和結果可以使用數字記錄/打印輸出進行記錄。無論使用哪種類型的測試，都必須正確處理孢子測試和控制條/安瓿，因為它們本身可能導致孢子測試失敗。例如，在實驗室測試的情況下，未能確保實驗室在初始測試的規定時間內收到測試條和控制條，或在實驗室處理不當，都會導致失敗。
在這里，我們以最快的為例描述了辦公室內孢子測試所需的步驟：
從同一批號中選擇 2 個安瓿。其中一個將用于滅菌器中，另一個將是留在滅菌器外的對照，以檢查批次中的孢子是否有缺陷 - 如果對照安瓿中的微生物死亡，那么孢子有問題，因為滅菌過程中只有測試安瓿在高壓滅菌器中
根據 IFU 將測試安瓿放入高壓滅菌器中
使用正確的循環和參數運行高壓滅菌器
從高壓滅菌器中取出安瓿
壓碎測試和對照安瓿以釋放引起酶促反應并因此產生熒光的酶
將兩個安瓿瓶放入培養箱中指定的時間
閱讀測試和控制的結果。
如果來自測試小瓶的孢子被殺死并且來自對照小瓶的孢子是活的，則該測試是陰性的，即它是“通過”結果。如果測試小瓶中的孢子沒有被殺死（“失敗”結果），則測試為陽性，如果兩個小瓶中的孢子都被殺死（也被視為“失敗”），則歸類為不確定。
獲得陽性結果的最常見原因是高壓滅菌器室中滯留了空氣。滯留空氣可能是由于高壓滅菌器過載或裝載不正確（例如紙塑袋的塑料面并非全部朝向同一方向）造成的。這些是操作員錯誤。陽性結果的第三個原因是高壓滅菌器未能達到正確的壓力，這可能是由于操作員錯誤或高壓滅菌器故障例如，真空脈沖未能正確去除空氣。與操作員錯誤相關的孢子測試失敗的其他原因包括操縱或中斷循環、使用錯誤的循環參數或不正確的包裝——例如，包裝太厚或折疊、未能執行維護和未能預熱高壓滅菌器（如果有說明） . 或者，雖然不太常見，但陽性結果可能是由于高壓滅菌器的機械故障。
| 原因 | 由于 |
| 室內空氣滯留 | 高壓滅菌器超載——操作員錯誤 |
| 錯誤加載高壓滅菌器 - 操作員錯誤 | |
| 未能達到正確的壓力——操作員錯誤或高壓滅菌器故障 | |
| 操縱/中斷循環 | 由于電源點問題導致操作員錯誤或中斷 |
| 使用錯誤的循環參數 | 操作員錯誤 |
| 不正確的包裝 | 類型錯誤/太厚/折疊 – 操作錯誤 |
| 未能執行維護 | 操作員錯誤 |
| 未能進行預熱 | 操作員錯誤 |
| 高壓滅菌器故障 | 與高壓滅菌器的測試和維護無關的問題 |
單個陽性孢子測試不一定表明失敗。需要進一步調查和進一步的孢子測試。采取的步驟包括：
隔離在此循環期間高壓滅菌的負載
審查自上次陰性孢子測試以來每個滅菌周期的機械和化學指示劑結果
如果達到所有要求的參數，請檢查可能導致孢子測試失敗的操作員錯誤的潛在來源并糾正這些錯誤。使用相同的高壓滅菌器和循環重復孢子測試
如果第二個孢子結果為陰性，則將高壓滅菌器重新投入使用。最保守的方法仍然是重新處理自上次陰性孢子測試以來處理的負載。一種不太保守的方法是將負載視為已正確消毒
如果第二次孢子檢測呈陽性，則必須停止使用滅菌器進行維護/維修或更換。如果滅菌器已修復并重新投入使用，應首先運行三個連續的空腔滅菌循環，每個循環的孢子檢測結果均呈陰性。此外，自上次陰性孢子測試以來處理的所有未使用的負載必須完全重新處理。
請注意，對于負載最保守的方法的要求始終適用于可植入設備。對于其他負載，此要求會有所不同 - 請務必遵守您所在位置的法規和建議。
進行孢子測試以確保無菌。孢子測試失敗需要立即關注。根據調查結果，操作員錯誤表明需要培訓或高壓滅菌器可能需要停止使用以進行維修/更換。必須維護完整的滅菌日志，包括所有滅菌監控——出于法律原因以及能夠跟蹤和重新處理受影響的負載。